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FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液使用說明

FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液使用說明

技術文檔編號:TBD0054SOP

ICLL PLUS不連續密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后,可形成不同濃度(密度)梯度分離液,經低速(200-1000g)離心于數分至數十分鐘內可達到滿意的細胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液不穿透細胞,無毒害,成功的用于動物細胞的分離。

試劑組成

名稱:FICOLL PLUS 密度梯度原液 貨號:P1114  100ml  梯度制備稀釋液 100ml

【簡介】

FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后,可形成不同濃度(密度)梯度分離液,經低速(200-1000g)離心于數分至數十分鐘內可達到滿意的細胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液不穿透細胞,無毒害,成功的用于動物細胞的分離。

【操作方法】

  • 不同濃度(密度)分離溶液的制備,使用梯度制備稀釋液參考下表將原液稀釋至所需濃度:

原液濃度(%

80

67

56

45

32

20

比重(g/ml

1.090

1.077

1.067

1.056

1.043

1.031

  • 梯度分離層的制備:將梯度分離液由高密度至低密度逐層加入至離心管內,加入后應可見明顯的梯度界面。
  • 上樣:根據不同目的細胞,加入不同體積血液樣品或單細胞懸液(樣本體積及細胞濃度不宜過高,否則影響細胞的分離及回收)。
  • 離心:400-600g 離心 20-30min。根據不同樣本個體差異及目的細胞特點,用戶可適當調節離心力及離心時間(離心力*大不超過 1000g)。
  • 取樣:當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時,可逐層去除分離溶液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于分離液層中,則需要逐層收集。收獲含有分離液的細胞經 2 次洗滌后可供培養或檢測用。

【注意事項】

  • 實驗全過程需在 20±2℃下進行,否則影響離心效果。
  • 由于多層分離溶液之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩。
  • 試劑瓶蓋需蓋緊,防止蒸發和污染。

【儲存條件及有效期】常溫保存,有效期 2 年。本品易感染**,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現白色結晶,影響分離效果。

【特殊細胞分離試劑盒舉例】

1. 富含 NK 活性大顆粒**細胞(LGL)的純化試劑盒(產品貨號:NK2011H

  • **母細胞純化和死細胞去除試劑盒(產品貨號:P1114B
  • 【人不同血細胞的漂浮密度】

細胞

漂浮密度

細胞

漂浮密度

紅細胞

1.090-1.110

**細胞

1.052-1.077

粒細胞


**細胞

1.062-1.075

嗜酸性

1.090-1.095

**細胞

1.065-1.077

嗜中性

1.080-1.085

**母細胞

1.065-1.077

單核細胞

1.050-1.066

自然殺傷細胞

1.050-1.070

血小板

1.030-1.060



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